Page 13 - Công Nghệ Sinh Học Cho Nông Dân Quyển 7
P. 13
cách ngâm trong cồn 70% trong 30 giây, rửa sạch bằng
nước cất vô trùng ngâm trong dung dịch Ca(OCl)2 2%
trong 25 phút, việc khử trùng được tiến hành trong tủ cấy.
Mô được rửa lại với nước cất vô trùng 4 -5 lần.
Mỗi mầm được đặt trong đĩa petri vô trùng và cẩn
thận tách các lá non. Sau mỗi lần tách, nhúng mầm vào
cồn 70° trong 1 giây và rửa với nước cất vô trùng.
Chuyển sang một đĩa petri vô trùng khác, tách các lá
mầm bằng dao nhọn vô trùng. Dùng kìm nhọn tách các
lớp lá, cắt đỉnh sinh trưởng ra khỏi mô và cấy vào môi
trường nhân giống ban đầu.
1.2. Nhân giống
Môi trường nhân giống thường là môi trường MS
(Murashige Skoog, 1962) có bổ sung các chất điều hoà
tăng trưởng (auxin, cytokinin,...) với tỷ lệ phù hợp tùy
loài, nhằm tạo điều kiện cho quá trình nhân chồi. Nồng
độ các chất điều hoà sinh trưởng nên giảm dần trong các
lần cấy chuyền sau đó. Các chất chiết xuất từ trái cây
cũng được đề nghị dùng như nước cốt cà chua, nước dừa,
nước chuối, nước khoai tây... nhưtig chúng chỉ có hiệu
quả trong các lần cấy chuyền và thể tích cũng không quá
10% thể tích môi trường.
Nhiệt độ lý tưởng để nhân giông Lan là 22 - 26°c và
tuỳ vào mỗi loài.
12