Page 66 - Công Nghệ Sinh Học Cho Nông Dân Quyển 7

tuần) thì tiến hành lấy mẫu vào nuôi cây. Nguồn mẫu
đưa vào nuôi có thể là thân đỉnh ngọn, cuống hoa, đế
hoa, cánh hoa, lá non hoặc cuống lá non. Mẩu được lấy
vào những ngày nắng ráo không có mưa.

Giai đoạn 2: Khử trùng nuôi cấy mô
Vì đỉnh ngọn của Đồng Tiền ít, khó bóc tách lại dễ bị
nhiễm bẩn, nên thường dùng đế hoa làm nguyên liệu
nuôi cấy mô. cắt lấy nụ có đường kính khoảng lcm, lấy
bông thấm nước muối rửa sạch, đưa vào tủ nuôi cấy mô.
Ngâm vào cồn 0,1% trong 10 - 15 phút, lấy ra rửa sạch
rồi cho vào dung dịch chlorua thuỷ ngân 0,1% tiêu độc
trong 20 phút, lấy ra dùng nước sạch rửa 3 -4 lần. Dùng

panh và dao bóc vẩy, cắt bỏ tất cả hoa nhỏ, giữ lấy đế
hoa. Cắt đế hoa thành từng miếng nhỏ vuông 2 -3 mm.
Nuôi cấy ở điều kiện nhiệt độ 24 ± 2°c, cường độ chiếu
sáng 2.000 - 3.000 lux. Mỗi ngày chiếu sáng 12 - 16 giờ.
Giai đoạn 3: Tái sinh chồi
Mục đích của giai đoạn này là tái sinh một cách định
hướng các mô nuôi cấy. Quá ưình này được điều khiển

chủ yếu dựa vào tỷ lệ các hợp chất auxin/xytokinin ngoại
sinh được đưa vào môi trường nuôi cấy thông thường bổ
sung vào nền MS theo tỷ lệ 1 ppm BA + 0,2 ppmki + 0,2
ppmlAA.
Môi trường nuôi cây Đồng Tiền giai đoạn đầu là: MS

65